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Bzup是通过高pH条件下的胍盐等离液剂和变性剂将动物组织裂解，并部分水解RNA，再经过乙醇沉淀即可快速得到基因组DNA。

主要用于从动物中提取基因组DNA，抽提出的DNA可用于酶切、PCR、文库构建、Southern blot等相关实验。操作快速简单，无需水浴，也不需要使用Proteinase K、氯仿等其它试剂，全过程可在30分钟内完成。适用范围广，可用于DNA小量提取，也可用于放量操作。

该试剂可以用于动物组织、细菌、培养细胞等材料中基因组DNA的抽提，适用范围较广，所抽提得到的DNA中会有少量RNA残留，如果需要无RNA的DNA溶液，请使用RNase A处理。

• 样品准备（细胞和细胞核的裂解）。
  
  • 动物组织：取25～50mg动物组织用液氮研磨成粉末，加入到1.5mL离心管中。加入1mL Bzup，震荡混匀，室温放置5～10min至完全裂解。
    
    • 取样过多会影响提取DNA的质量（动物脾脏取样量应≤10mg）。如需抽提大量的DNA，可根据动物组织的用量相应增加Bzup的用量。
      
    • 加入Bzup后，一定要充分震荡，至溶液中无明显组织团块即为完全裂解。
  • 贴壁培养细胞：弃尽培养液，按每10cm2细胞加入1mL Bzup的量直接将Bzup加入细胞培养瓶中，轻轻晃动培养瓶至细胞完全裂解，将裂解液转移至新的离心管中。
    
  • 悬浮培养细胞：收集1～3×10⁷细胞，离心去除培养液，加入1mL Bzup，震荡混匀，室温放置5～10min至样品完全裂解。
    
  • 革兰氏阴性细菌：取1mL过夜培养的细菌菌液，加入1.5mL离心管中，室温8000rpm离心1min，弃上清，收集菌体。加入1mL Bzup，震荡混匀，室温放置5～10min至完全裂解。
    
    • 加入Bzup后，一定要充分震荡使菌体悬浮，至溶液中无明显组织团块。
  • 革兰氏阳性细菌：取1mL过夜培养的细菌菌液，加入1.5mL离心管中，室温8000rpm离心1min，弃上清，收集菌体。加入180μL溶菌酶溶液（3mg/mL）重悬菌液，37℃水浴30～60min。加入820μL Bzup，震荡混匀，室温放置5～10min至完全裂解。
    
  • 酵母细胞：10000rpm离心1min收集菌体沉淀，配制1mM山梨醇，10mM CaCl₂，0.1M EDTA，pH7.5的酶解缓冲液，按每20mg菌体湿重取600μL酶解缓冲液重悬菌体，同时加入2.4μL β-巯基乙醇和100μL的Snailase储存液，37℃水浴3h。室温10000rpm离心2min，弃上清。在沉淀中加入1mL Bzup，震荡混匀，室温放置5～10min至完全裂解。
    
    • 使用前配制20mM pH7.4的K2HPO4- KH2PO4溶液，加入50%的甘油，每5mL加入600mg Snailase，充分溶解，-20℃保存。
  • 离心：10000rpm室温离心10min，将上清（约900μL）转移到新的1.5mL离心管中。
    
  • 此步去除不溶的组织碎片和水解的RNA等杂质。
• 沉淀：加入500μL无水乙醇，颠倒混匀5～8次，室温放置2～3min，如有DNA沉淀产生，用移液枪头将沉淀的DNA挑取到新的1.5mL离心管中。若无法挑取，8000rpm室温离心5min，弃上清。
  
• 漂洗：加入1mL 75%乙醇，颠倒漂洗1～3min，12000rpm离心2min，弃上清。再重复此步骤一次。
  
  • 漂洗时一定要使沉淀悬浮起来。
• 晾干：开盖室温倒置5～10min至残留的乙醇完全挥发。
  
  • 此步绝不可省略，否则残余的乙醇会严重影响后续实验。
    
  • 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10分钟至残留的乙醇完全挥发。
• 溶解：得到的DNA用新鲜配制的8mM NaOH溶解。一些动物组织富含糖原，加入8mM NaOH充分溶解后可能有不溶物，12000rpm离心2min，取上清。提取的DNA可立即进行下一步实验或-20℃保存。
  
  • 通常提取的DNA可用50～200μL 8mM NaOH溶解。
    
  • 提取的DNA可能有少量RNA污染，一般不影响使用。如需去除RNA，可向DNA溶液中加入RNase去除。
    
  • 8mM NaOH易吸收空气中的CO₂，配制时间应在一个月以内。
    
  • 8mM NaOH也可以用TE Buffer或水代替。
• 中和：按每1mL用8mM NaOH溶解的DNA溶液加入100μL的比例加入0.1M HEPES（free acid）溶液将该DNA溶液pH调节至8.0附近。
  
  • 如果使用TE buffer溶解DNA则不需要该步骤。